Die Anime-Serie "My One-Hit Kill Sister" basiert auf einer Light-Novel-Reihe und erzählt die Geschichte von Maya Ikusaba, einer übermächtigen Schwester, die in einer Fantasiewelt lebt. Maya besitzt die Fähigkeit, jeden Gegner mit einem einzigen Schlag zu besiegen, was ihr den Spitznamen "One-Hit Kill Sister" einbringt. Ihr jüngerer Bruder, Makoto Ikusaba, wird unerwartet in diese Welt hineingezogen und findet sich in einer gefährlichen Umgebung wieder, in der er ohne Mayas Schutz kaum überleben könnte.

Die Handlung beginnt damit, dass Makoto in die Fantasiewelt teleportiert wird und schnell feststellt, dass er in einer Welt voller Monster und Gefahren gelandet ist. Maya, die bereits in dieser Welt lebt und als eine der stärksten Kriegerinnen bekannt ist, nimmt sich sofort seines Schutzes an. Die Dynamik zwischen den beiden Geschwistern steht im Mittelpunkt der Serie: Maya ist überfürsorglich und beschützt Makoto oft übermäßig, während er versucht, selbstständiger zu werden und seine eigenen Fähigkeiten zu entwickeln.

Im Laufe der Serie treffen Maya und Makoto auf verschiedene Charaktere, darunter andere Abenteurer, Monster und mysteriöse Wesen. Maya nutzt ihre überwältigende Kraft, um jeden Feind zu besiegen, der ihnen in den Weg kommt, während Makoto versucht, sich an die neue Welt anzupassen und seine Rolle in ihr zu finden. Die Serie kombiniert Action, Humor und familiäre Bindungen, wobei die Beziehung zwischen den Geschwistern immer wieder thematisiert wird.

Die Handlung entwickelt sich durch verschiedene Abenteuer und Begegnungen, bei denen Maya und Makoto neue Herausforderungen meistern müssen. Dabei wird auch die Hintergrundgeschichte der Fantasiewelt und Mayas Rolle darin nach und nach enthüllt. Die Serie bleibt dabei leicht zugänglich und konzentriert sich auf die unterhaltsamen Aspekte der Geschwisterbeziehung und die actionreichen Kämpfe, die Maya mit ihrer einzigartigen Fähigkeit bestreitet.